АЛГОРИТМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГРУПП КРОВИ ПО СИСТЕМЕ АВО
«Инструкция по определению групп крови по системе АВО»
(Приказ МЗ Украины от 05.07.1999 г. № 164)
«Инструкции о применении набора диагностических
Моноклональных реагентов анти-А, анти-В и анти-АВ
Для определения групп крови человека по системе АВО »
От 16.02.2006 г.
Определение группы крови по системе АВО проводят моноклональными реагентами (мышиные моноклональные Ig M) анти-А, анти-В и анти-АВ обычными методами определения антигенов эритроцитов и агглютининов в сыворотке (плазме) крови с помощью стандартных эритроцитов.
І. Определение группы крови с помощью моноклональных реагентов (цоликлонив) анти-А и анти-В
Материалы:
Моноклональные реагенты (цоликлоны) анти-А (розового цвета), анти-В (синего цвета) по 5мл во флаконах.
Маркированные пипетки («анти-А», «анти-В» и т.д.)
Белая фарфоровая пластинка
Кровь больного (взята из антикоагулянтом)
^ Условия проведения исследований:
Определение группы крови проводится в помещении с достаточным освещением при температуре от 15 ° С до 25 ° С.
Необходимо работать в перчатках.
Необходимо проверить срок годности реагентов.
Не следует пользоваться моноклональными реагентами, если они имеют нерастворимый осадок или помутнение.
Для каждого реагента используют отдельную промаркированную пипетку.
Моноклональные реагенты не следует хранить открытыми.
^ Техника определения группы крови с помощью цоликлонив антигенов А и В:
1 Нанести на планшет или на белую фарфоровую пластинку под соответствующими надписями «Анти - А» и «Анти - В» по одной капле (100 мкл) цоликлона анти-А и анти-В.
2. Рядом с каплями антител нанести по одной капле (50 мкл) исследуемой крови (соотношение кровь: реагент - 1:10)
В случае определения группы крови, взятой с пальца или взятой без консерванта, необходимо обеспечить достаточно большое количество эритроцитов, то есть брать первые капли с пальца (без сильного выдавливания) или свободные эритроциты из осадка крови, которая свернулась (без чрезмерного количества сыворотки).
3. Реагенты и кровь тщательно смешать чистой, сухой, стеклянной палочкой на пластине.
4. Наблюдать за ходом реакции при легком покачивании пластины или планшета в течение 5 минут (через возможность более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В).
^ Оценка результатов:
Положительный результат - выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов.
Агглютинацию можно наблюдать невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, которые быстро сливаются, образуют большие хлопья или один большой аглютинат.
^ Отрицательной результат - капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, аглютинаты в ней не наблюдаются.
Кровь относится к группе 0 (I) , если отсутствует (-) агглютинация с
Цоликлонамы анти-А и анти-В.
Кровь принадлежит к группе А (II) , если агглютинация (+)
Наблюдается с цоликлоном анти-А.
Кровь принадлежит к группе В (III) , если агглютинация (+)
Наблюдается с цоликлоном анти-В.
Кровь принадлежит к группе АВ (IV) , если агглютинация (+)
Наблюдается с цоликлоном анти-А, анти-В и анти-АВ.
Табл. 1 ^ Трактовка результатов реакции
Реакция эритроцитов, которые исследуются, с моноклональными реагентами (цоликлонамы)
Анти - А Анти - В Контроль Анти - АВ
АВ (IV)
| ^ Группа исследуемой крови
| Реакция эритроцитов, которые исследуются, с моноклональными реагентами (цоликлонами) |
||
| Анти - А | Анти – В | Контроль Анти - АВ |
|
| 0(І) | - | - | - |
| А (II) | + | - | + |
| В (III) | - | + | + |
| АВ (IV) | + | + | + |
^ ТЕХНИКА ВНУТРИВЕННЫХ ИНЪЕКЦИЙ
Оснащение: Стерильная игла и шприц одноразового использования емкостью 10 или 20 мл в упаковке, стерильные резиновые перчатки одноразового использования в упаковке, лекарственные препараты в ампулах и флаконах, пилочка, 70% р-р этилового спирта, ватные шарики, жгуты, полотняная салфетка (полотенце), лоток для использованных инструментов
и материалов, пинцеты в тройном растворе.
| Этапы | Обоснование |
| І. Подготовка процедуры | |
| 1.Тщательно вымыть дважды руки с мылом, вытереть полотенцем, обработать 70% раствором | |
| 2. Сверить надпись на ампуле, обратить внимание на срок годности. | |
| 3.Освободить одноразовый шприц и иглу от упаковки. | |
| 4.Раствор набрать из ампулы в шприц. | |
| 5.Удалить из шприца пузырьки воздуха. | Предотвращения образования эмболии. |
| 6.Покласть шприц с набранными леч. веществами на лоток. | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
| 7.На этот лоток положить 3 ватные шарики, смоченные в 70% р-ре этилового спирта. | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
| 8.Провесты психологическую подготовку пациента. | |
| 9.Пры выполнении инъекций пациент должен лежать в постели. | Предотвращения обморока. |
| 10.Рука пациента должна располагаться на столе в удобном, максимально разогнутом в локтевом сгибе положении. | |
| ІІ. Выполнение процедуры. | |
| 1. Наметить место инъекции. Удобнее выполнять внутривенную инъекцию в вены локтевого сгиба. | Это объясняется хорошей фиксацией вены в подкожной основе, что не дает ей возможности смещаться и спадаться во время инъекции. |
| 2.На плечо выше локтевого сгиба наложить резиновый жгут; под жгут подложить полотняную салфетку. Жгут завязать так, чтобы свободные концы были направлены вверх и не мешали при выполнении инъекции, а также чтобы его можно было легко р азвязать левой рукой. | Обеспечивается четкое контурирование вен и создание искусственного венозного спазма. |
| 3.Предложить пациенту несколько раз энергично сжать и разжать кулак. Растереть сгибательную поверхность предплечья рукой в направлении от кисти к локтевому сгибу. | Обеспечивается усиление венозного застоя. |
| 4.Кончиком указательного пальца правой руки прощупать вены локтевого сгиба и выбрать большую и малоподвижную вену. | |
| | |
| | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
| 7.Взять наполненный лекарством шприц правой рукой так, чтобы 2 палец поддерживал муфту иглы, 1, 3 и 4 пальцы - цилиндр шприца, а 5 палец находился на поршне. | |
| 8.Первым пальцем левой руки оттянуть кожу ниже намеченного места инъекции. | |
| | |
| 10.Опуститы шприц и провести иглу еще на 5-10 мм по ходу вены. При правильном положении иглы в вене в шприце появится темная венозная кровь. У пациентов с низким артериальным давлением кровь в шприце будет после того, как поршень шприца слегка потянуть на себя. Если с первого раза не удалось попа сть в вену, нужно потянуть иглу немного на себя или ввести ее чуть глубже, но чтобы она оставалась в подкожной основе. | |
| 11.Перед введением раствора левой рукой осторожно снять наложенный на плечо резиновый жгут, предложить пациенту разжать кулак. | Обеспечивается правильное и быстрое попадание лекарства в кровь. |
| 12.Не меняя положения шприца первым пальцем левой руки нажать на рукоятку поршня, и медленно ввести препарат. При медленном введении препарат не вызывает нежелательной реакции организма. | При медленном введении препарат не вызывает нежелательной реакции организма. |
| ІІІ. Окончание процедуры | |
| 1.После окончания введения лекарственного вещества приложить к месту инъекции стерильный ватный шарик, смоченный в 70% растворе этилового спирта. | Обеспечивается инфекционная безопасность; предотвращения возникновения обморока. |
| 2.Предложить пациенту согнуть руку в локтевом суставе и зажать ватный шарик со спиртом на 3-5 мин. Запретить пациенту резко вставать после инъекции. | Обеспечивается инфекционная безопасность; предотвращение возникновения обморока. |
| 3. Отработанные ватные шарики погрузить в 5% растворе хлорамина в емкости, пр о маркированные "Для использованных ватных шариков » на 1 час . | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
| 4.Отработанный шприц погрузить в 5% растворе хлорамина, в емкости промаркированной "Для замачивания одноразовых шприцов и игл" на 1 час. | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
| 5.Вимиты дважды руки с мылом под проточной водой, вытереть. | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
^ Взятие крови с вены для иммунологических и биохимических исследований
Оснащение: Стерильные игла и шприц одноразового использования емкостью 10 или 20 мл в упаковке, стерильные резиновые перчатки одноразового использования в упаковке, стерильная маска одноразового использования в упаковке, пинцет, стерильный лоток, стерильные ватные шарики, 70% р-р этилового спирта, пробирки чистые, сухие в штативе, жгут, полотняная салфетка, чистый лоток, лоток для использованных инструментов и материалов, ножницы.
| Этапы | Обоснование |
| І. Подготовка процедуры | |
| 1.Принесты с лаборатории чистые, сухие пробирки в штативе. | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
| 2.Провести психологическую подготовку пациента. | Поощряется пациент к сотрудничеству. |
| 3.Предупредить пациента, что анализ крови он должен сдать натощак (запрещается пить, курить, использовать медикаменты) | Поощрение пациента к сотрудничеству. |
| 4. Предложить пациенту удобно сесть на стул, руки положить на специальный столик ладонью дороги в максимально разогнут ом положении. | Поощрение пациента к сотрудничеству. |
| 5.Одеть полиэтиленовый фартук. | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
| 6.Тщательно вымыть руки дважды с мылом под проточной водой, вытереть полотенцем, обработать 70% раствором этилового спирта, одеть резиновые перчатки. | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
| 7.Одеть стерильную маску. | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
| ІІ. Выполнение процедуры | |
| 1.Наметить место пункции в локтевом сгибе. | Обеспечивается хорошая фиксация вен в подкожной основе, не дает ей возможности смещаться и спадаться при инъекции |
| 2.На плечо выше локтевого сгиба наложить резиновый жгут, под жгут подложить полотняную салфетку. Обеспечивается четкое контурирование венозных стволов. | Обеспечивается четкое контурирование венозных столбов. |
| 3.Предложить пациенту несколько раз энергично сжать и разжать кулак. Растереть сгибательную поверхность предплечья рукой в направлении от кисти до локтевого сгиба. | Обеспечивается усиление венозного застоя. |
| 4.К он чиком указательного пальца правой руки про пальпировать вены локтевого сгиба и выбрать большую и мало подвижную вену. | |
| 5.Предложить пациенту сжать кулак. | Обеспечивается четкое контурирование вены. |
| 6.Дважды протереть место инъекции стерильными ватными шариками, смоченными в 70% растворе этилового спирта. | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
| 7.Взяты шприц правой рукой так, чтобы 2 палец поддерживал муфту иглы, 1, 3, и 4 пальцы - цилиндр шприца, а 5 палец находился на поршне. | |
| 8.Першим пальцем левой руки оттянуть кожу ниже намеченного места пункции. | Обеспечивается точная фиксация вены. |
| 9.Иголку шприца установить под острым углом к поверхности кожи по направлении кровотока. Срез иглы должен быть вверх. Осторожно проколоть кожу и стенку фиксированной вены. | Обеспечивается правильность ухода. |
| 10.Опустит ь шприц и провести иглу еще на 5-10 мм по ходу вены. Если с первого раза не удалось попасть в вену, нужно потянуть иглу немного на себя или ввести ее чуть глубже, но она оставалась в подкожной основе. | |
| 11.Под время взятия крови из вены жгут с руки не снимать, кулак пациент не должен розтискуваты. После заполнения шприца необходимо количеством крови (по назначению врача) снять жгут, предложить пациенту разжать кулак. | |
| ІІІ. Окончание процедуры | |
| 1.После манипуляции приложить к месту пункции стерильную ваттную шарик смоченную в 70% растворе этилового спирта и вытащить иглу из вены. | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
| 2.Пациенту предложить согнуть руку в локтевом суставе и зажать ватный шарик со спиртом на 3-5 мин. | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
| 3.Отсоединить иглу от шприца и положить ее в лоток. | |
| 4.В левую руку взять чистую, сухую пробирку, наклоняя ее, а правой рукой осторожно выпустить кровь из шприца по стенке пробирки. | Предотвращение быстрому распады форменную элементов крови. |
| 5.Пробирку с кровью поставить в штатив, закрыть ватным тампоном. | |
| 6.Прикр е пит ь этикетку-направлени е в пробирк у с внешней стороны. | |
| 7.Видпрацьовани ватные шарики погрузить в 5% растворе хлорамина в емкости, промаркированы "Для использованных ватных шариков » на 1 час . | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
| 8.Через 3-4 часа пробирки доставить в лабораторию. | |
| 9.Вимиты дважды руки с мылом под проточной водой, вытереть чистым полотенцем. | Обеспечивается инфекционная безопасность. |
^ КАТЕТЕРИЗАЦИЯ МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ.
Показания:
Глубокое нарушение сознания и необходимость почасового измерения диуреза;
Острая задержка мочи.
Противопоказания .
Стриктура мочевого канала, обтурация камнем и опухолью, травма, инструментальное повреждение задней стенки уретры, уретрорагия, острый уретрит, простатит, эпидидимит, орхит.
Необходимые инструменты:
Мочевой катетер (мягкий или металлический);
Стерильные перчатки;
Стерильный глицерин или вазелиновое масло.
Техника.
Для катетеризации используют как мягкие, так и металлические катетеры. Перед использованием катетер смазывают стерильным глицерином или вазелиновым маслом. Катетеризацию мочевого пузыря необходимо выполнять в стерильных резиновых перчатках.
Перед катетеризацией мочевого пузыря у женщин проводят туалет наружных половых органов. Пинцетом фиксируется мягкий катетер на расстоянии 4-5 см от пузырного конца и медленно без труда вводит в мочевой канал. Наружный конец мягкого катетера зажимают между безымянным пальцем и мизинцем правой руки. Утечка мочи через катетер означает, что он находится в мочевом пузыре.
При катетеризации мочевого пузыря у мужчин больной лежит на спине.. Исполняющий манипуляцию становится справа, левой рукой берет половой член, правой сдвигает вниз крайнюю плоть, обрабатывает головку салфеткой (шариком), смоченной раствором фурацилина. Половой член под головкой необходимо обернуть марлевой салфеткой, чтобы удобнее было его удерживать. Резиновый катетер вводят так же, как при катетеризации мочевого пузыря у женщин.
При проведении катетера в мочевой канал половой член несколько натягивается вверх (на катетер). Это способствует более глубокому прохождению катетера по мочевому каналу. При ощущении препятствия на пути следования катетера его нужно слегка вытянуть и попробовать провести повторно. Длина мочевого канала у мужчин в среднем равна 20 см. Как только катетер попадает в мочевой пузырь, из него начинает выделяться моча.
Если мягкий катетер ввести не удается, применяют мужской металлический катетер. При этом тремя пальцами левой руки берут половой член в области головки, слегка натягивают и поднимают его параллельно пупартовий связке. Правой рукой вводят в уретру катетер, повернутый клювом вниз. Одновременно осторожно натягивают на катетер половой член. Катетер, продвигаясь вниз и проникая в предстательную часть уретры, обычно встречает незначительное препятствие. После этого половой член вместе с катетером перекладывают на срединную линию живота и постепенно опускают вниз в сторону мошонки. При этом ощущается некоторое сопротивление внутреннего сфинктера мочевого пузыря.
Как только катетер попадает в мочевой пузырь, из него начинает выделяться моча.
Для извлечения катетера из мочевого пузыря половой член поднимают вверх к срединной линии живота, слегка наклоняют в сторону пупка и после этого начинают вытягивать катетер. Как только он выходит за лобковые сочленения, половой член поворачивают налево и извлекают катетер.
^ МЕТОДИКА ИЗМЕРЕНИЯ АРТЕРИАЛЬНОГО ДАВЛЕНИЯ
Адекватное артериальное давление (АД) является основным фактором поддержания трофики и функционирования жизненно важных органов организма. Существуют инвазивные и неинвазивные методики измерения АД. Большее преимущество за простоту и доступность в клинической практике получили неинвазивные методы измерения АД. В зависимости от принципа, вложенного в их основу, различают:
Пальпаторный;
Аускультативный;
Осциллометрический.
Аускультативный метод был предложен М.С. Коротковым в 1905 году. Типичное устройство для определения давления по методу Короткова (сфигмоманометр или тонометр) состоит с пневмоманжеты, груши для накачивания воздуха с регулированным клапаном для сдувания и устройства для измерения давления в манжете. В качестве такого устройства используют или ртутные, или стрелочные, или электронные манометры. Выслушивание проводится стетоскопом или мембранным фонендоскопом с расположением чувствительной головки у нижнего края манжеты над плечевой артерией без значительного надавливания на кожу. Аускультативная методика в наше время признана ВОЗ как референтный метод неинвазивного определения АД, учитывая даже то, что занижаются цифры систолического и завышаются цифры диастолического, по сравнению с цифрами, полученными при инвазивном исследовании. Важным преимуществом метода является более высокая устойчивость к нарушениям ритма сердца и возможным движениям руки во время измерения. Погрешности измерения давления этим методом составляют 7-14 мм рт. ст. Всем пациентам, страдающим артериальной гипертензией, очень важно постоянно контролировать своё АД, своевременно обращаться за медицинской помощью при его тенденции к повышению. Достоверные результаты при измерении АД могут быть получены при использовании основных правил по отношению не только к устройству для измерения АД, но и самого пациента и его окружающей среды. Звуки, которые мы слышим при измерении АД называют тонами Короткова. Они проходят 5 фаз:
Начальный «стук» (давление в манжетке соответствует уровню систолического давления).
Интенсивность звука нарастает.
Звук достигает максимальной силы.
Звук утихает.
Тоны исчезают(диастолическое давление).
Минимальное количество измерений АД – дважды с утра и дважды вечером (если нет специальных указаний лечащего врача) на протяжении 3 рабочих дней в неделю.
Цифры АД в первый день использования аппарата, как правило, выше, чем в последующие дни, и не могут рассматриваться как диагностически ценные и возможные. Каждый человек должен помнить, что на протяжении первых 2-3 дней они с аппаратом привыкают друг к другу.
Аппарат должен быть проверен метрологической службой.
АД нужно измерять в тихой спокойной обстановке при комнатной температуре (приблизительно 21°С, т.к. низкая температура может привести к повышению давления), нужно исключить внешние раздражители. Измерения должны производиться после 5-ти минутного отдыха и через 1-2 часа после приёма пищи. При отсутствии сопутствующих заболеваний достаточно стандартного измерения в положении сидя, людям пожилого возраста рекомендуется дополнительно проводить измерение ещё стоя и лёжа.
Для измерения АД в положении сидя нужен стул с прямой спинкой. Ноги должны быть расслабленны и ни в коем случае не скрещены. Середина манжеты должна быть на уровне 4 межреберья. Отклонения положения манжеты может привести к изменению давления на 0.8 мм. рт. ст на каждый см (завышению АД в положении манжеты ниже уровня сердца или занижению при положении манжеты выше уровня сердца). Сопротивление спины на спинку стула и сопротивление руки на стол исключают повышение АД за счёт изометрического напряжения мышц.
На протяжении часа до измерения давления не стоит курить и пить кофе или чай, и на теле не должно быть тесной одежды, рука на которой проводится исследование, должна быть без одежды. Во время измерения давления не рекомендуется разговаривать.
^ Сначала измеряют уровень АД пальпаторным методом. Для этого необходимо определить пульс на a.radialis и потом быстро накачать воздух в манжетку до 70 мм. рт. ст. Потом нужно накачивать по 10 мм. рт. ст. до значения, при котором исчезает пульсация. Тот показатель, при котором пульсация появляется опять при выпускании воздуха, отвечает систолическому АД. Такой пальпаторный метод определения помогает исключить ошибку, связанную с «аускультативным провалом» (исчезновение тонов Короткова сразу после их первого появления). Повторно накачивают воздух на 20 – 30 см выше значений систолического АД, которые были определены пальпаторно.
При первичном измерении давления стоит определить его на обеих руках и в дальнейшем измерять АД на одной и той же руке, где давление было выше (разница АД на обеих руках до 10-15 мм рт. ст считается нормальной).
Длина внутренней камеры манжеты должна перекрывать не менее 80% длины окружности руки и не менее, чем 40% длины плеча. АД, как правило, измеряют на правой руке, вследствие более развитой мускулатуры. Использование узкой или короткой манжеты может привести к ложному повышению АД.
Средина баллона манжеты должна находиться под пальпируемой плечевой артерией, а нижний край манжеты должен быть на 2.5 см выше локтевой ямки.
Мембрану фонендоскопа разместить на точку пульсации плечевой артерии (ориентировочно в область локтевой ямки).
Быстро накачать воздух в манжету при помощи груши (не забыть перед этим закрыть клапан (вентиль) груши, чтобы воздух не выходил наружу). Накачивать до уровня на 20-40 мм больше, чем систолическое давление (которое мы ожидаем) или до прекращения пульсации на плечевой артерии.
Медленно выпускать воздух из манжеты (при помощи клапана). Первый удар (звук, тон), который мы услышим, соответствует значению систолического АД. Уровень прекращения тонов соответствует диастолическому давлению. Если тоны очень слабые, следует поднять руку, несколько раз ее согнуть и разогнуть и повторить измерение.
При выраженных нарушениях ритма у больного (фибрилляция предсердий) следует повторить измерение.
Людям с нарушениями ритма желательно проводить несколько измерений за определённое время (например, 4 измерения за 15 минут в состоянии покоя).
С возрастом наблюдается утолщение и уплотнение стенки плечевой артерии, вследствие чего при измерении происходит ложное увеличение уровня АД. В этом случае необходимо параллельно пропальпировать лучевую артерию и сориентироваться до появления пульса на ней. Если разбег в систолическом давлении превышает 15 мм рт ст., то определить достоверное АД можно только инвазивным методом.
Нормальным у взрослых считается уровень систолического давления до 139 мм рт. ст., а диастолического- 89 мм рт.ст.
^ МЕТОДИКА РЕГИСТРАЦИИ ЭКГ
Электрокардиограмма (ЭКГ) - это запись колебаний разницы потенциалов, которые возникают на поверхности возбуждённой ткани или проводящей среды, которая окружает сердце при распространении волны возбуждения по сердцу. Для получения качественной записи ЭКГ нужно тщательно придерживаться некоторых общих правил регистрации.
ЭКГ регистрируют в специальном помещении, которое не должно находится близко от источников электрических помех: мониторов, физиотерапевтических и рентгенологических кабинетов, и т.д. Кушетка должна быть на расстоянии, не менее 1,5 - 2м от проводов электросети. Обоснованным также является экранирование кушетки, путем подкладывания под пациента металлической сетки, которая должна быть заземлена.
Исследование проводится после 15-20 минутного отдыха и не ранее, чем через 30 минут после приёма пищи. Пациент должен быть раздет до пояса, голени должны быть свободны от одежды также. Запись ЭКГ обычно проводится в положении лёжа на спине, что позволяет достичь максимального расслабления мышц больного.
На внутреннюю поверхность голеней и предплечий на нижнюю их треть при помощи резиновых лент накладывают 4 пластинчатых электрода, а на грудь устанавливают 1 или несколько (при многоканальной записи) грудных электродов, используя резиновую присоску. Для улучшения качества ЭКГ и уменьшения количества наводных токов, следует обеспечить хороший контакт электродов с кожей. Для этого необходимо: обезжирить кожу спиртом в местах наложения электродов; при сильном оволосении кожи намочить места наложения электродов мыльным раствором, укрыть электроды слоем специального токопроводящего геля, который позволяет максимально снизить межэлектродное сопротивление. К каждому электроду на конечностях и на грудной клетке присоединяют провод, который идёт от электрокардиографа и имеет определенный цвет: правая рука-красный, левая рука - жёлтый, левая нога - зелёный и правая нога - чёрный, грудной электрод – белый цвет. Если электрокардиограф 6-ти канальный, позволяющий одновременно регистрировать ЭКГ в 6-ти грудных отведениях, к V1 подключают провод красного цвета, к V2 – жёлтого, к V3 – зелёного, к V4 – коричневого, к V5 – чёрного и к V6 – синего или фиолетового.
Грудные отведения, которые были предложены Wilson в 1934 году имеют следующую локализацию:
V1 – активный электрод, который установлен в четвёртом межреберье по правому краю грудины;
V2 - активный электрод, который установлен в четвёртом межреберье по левому краю грудины;
V3 – активный электрод, который размещен между вторым и четвёртым электродом, приблизительно на уровне четвёртого ребра по левой парастернальной линии;
V4 - активный электрод, который установлен в пятом межреберье по левой грудинно-ключичной линии;
V5 - активный электрод, который размещен на том же горизонтальном уровне, что и V4 по левой подмышечной линии;
V6- активный электрод, который размещен по левой срединно-подмышечной линии на том же горизонтальном уровне, что и электроды отведений V4 и V5.
Перед тем, как начать запись ЭКГ, на всех каналах электрокардиографа нужно установить одинаковое усиление электрического сигнала. Для этого в каждом электрокардиографе есть возможность подачи на гальванометр стандартного калибровочного напряжения, которое равно 1 mV. Обычно усиление каждого сигнала из каналов подбирается таким образом, чтобы напряжение 1 mV вызывало отклонение гальванометра и регистрационной системы, равное 10 мм. Для этого в положении переключателя отведений «0» регулируют усиления электрокардиографа, регистрируют калибровочный милливольт. При необходимости можно заменить усиления: уменьшить при очень большой амплитуде зубцов ЭКГ (1 mV=5мм) или увеличить при их малой амплитуде (1mV=15 или 20мм).
Запись ЭКГ осуществляют при спокойном дыхании. Сначала записывают ЭКГ в стандартных отведениях (I,II,III), потом в усиленных отведениях от конечностей (aVR,aVL,aVF) и грудных отведениях (V1-V6). В каждом отведении записывают не менее, чем 4 сердечных цикла PQRST. ЭКГ регистрируют, как правило, при скорости движения бумаги 50мм*с -1 . Меньшую скорость (25 мм*с -1) используют при необходимости более долгосрочной записи ЭКГ, например, для диагностики нарушений ритма. Сразу после окончания обследования на бумажной ленте записывают фамилию, имя и отчество пациента, его возраст, дату и час исследования.
^ CЕРДЕЧНО-ЛЕГОЧНАЯ РЕАНИМАЦИЯ.
Медицина критических состояний, начало которой положили исследования В. А. Неговского и П. Сафара во второй половине ХХ века, достигла значительных успехов. Сьогодня проведение сердечно-легочной реанимации (СЛР) позволяет возобновить кровообращение у 17,4 - 58% и даже у 61,2% пациентов со внезапной остановкой кровообращения. При этом 18,5% пациентов, которые перенесли СЛР, проживает 7 лет и более . Прогноз СЛР зависит от начала и правильности провдения комплекса реанимационных мероприятий. . Ежегодно в мире регистрируют более 200 тыс. реанимаций в условиях стационара, в результате которых к жизни возвращаются около 70 тис. пациентов (приблизительно 35% реанимированных) . Согласно данням V.J. Mayo, во внегоспитальных условиях удается реанимировать только 5% больных . В настоящее время разработкой и систематизацией стандартов по СЛР занимаются Американская Асоциация Кардиологов (American Heart Association - AHA) и Европейский сонет по реанимации (European Resuscitation Council - ERC). Для обобщения результатов исследований по СЛР, которыек проводяться в разных странах мира, был создан Международный объединенный комітет по реанимации (International Liason Comittee on Resuscitation - ILCOR), который регулярно проводит пересмотр международных консенсусних решений. Последний пересмотр рекомендацій был осуществлен ERC в 2005 г.,
Комплекс мероприятий СЛР условно делят на 3 стадии (немедленную, специализированную и послереанимационную).
Первая стадия (немедленная, стадия елементарной піддержки жизни) не обходимо начать немедленно, непосредственно на месте происшествия, любым человеком знакомым с элементами СЛР (см. рис. 1):
1) уложить потерпевшего на спину, на твердую поверхность;
2) диагностировать клиническую смерть на основании наличия не менее 2х основних признаков (не болем 10 с):
Отсутствие пульса на крупних артериях (сонной - на уровне верхнего края щитовидного хряща „кадыка”, смещая подушечки указательного и среднего пальцев до внутреннего края грудино - ключично - сосковидной мышцы; бедренной - на границе средней и медиальной трети паховой связки)
Отсутствии самостоятельного дыхания (визуально, ощущение дыхания на своїй щеке – тактика «смотри, слушай, чувствуй»);
Расширение зрачков (поднять веко).
3) перейти к I стадии СЛР:
Показания и противопоказания к проведению СЛР – см. Приложение 1.
Рис. 1. Алгоритм проведения СЛР на догоспитальном етапе
I стадия - стадия элементарной базовой поддержки жизнедеятельности (немедленный период)
Цель: екстренная оксигенация, востановление проходимости дыхательных путей.
1. Востановление проходимости дыхательных путей с помощью тройного приема П. Сафара, котрый заключается в разгибании головы в атлантозатылочном соединении, выдвигании нижней челюсти и открывании рта. Для этого ладонь одной руки рас положите так, чтобы ее ребро находилось на границе волосистой части головы. Другой рукой удерживайте подбородок (альтернативный метод – подложить под шею). Содружественным движением обеих рук разогните голову в шейнозатылочном соединении (рис.2).
Рис. 2. Тройной прием П.Сафара
2. Для проведения исскуственной вентиляции легких (ИВЛ) у потерпевшего без обструкции дыхательных путей :
Перекройте носовые отверствия потерпевшего с помощью большого и указательного пальцев руки, которая лежит на лбу;
Откройте потерпевшему рот, удерживая подбородок поднятым кверху.
Сделайте обычный вдох, после чего проведите спокойный выдох в рот потерпевшего, наблюдая за движением грудной клетки. Общая длительность выдоха должна составлять около 1 с, объем отвечает дыхательному объему реаниматолога (400-600 мл.).
Удерживайте дыхательные пути открытыми, убедитесь в наличии пасивного выдоха.
Повторите манипуляцию еще раз, посля чего немедленно начните проведение компрессий грудной клетки идыхания в соотношении 30:2.
3. Для проведения ИВЛ у пострадавшего с нарушением проходимости дыхательных путей :
Указательным пальцем проведите ревизию ротовой полости, удалите чужеродные тела, обломков зубов, рвотные массы и т.п.
Обеспечте проходимость дыхательных путей и начните ИВЛ самым оптимальным способом: кислородной маской, мешком Амбу, воздуховодом, ларенгиальной маской, I-gel-маской. Самым надежным методом обеспечения проходимости дыхательных путей является интубация трахеи – воздуховод после открывании рта введите изгибом от языка, потом поверните на 180° и введите внутрь до упора в мягкие ткани.
Инспираторное время составляет 1 с., дыхательный объем должен составлять 400-600 мл.
При заинтубированной трахеи вентиляцію проводять с частотой 10-12 за 1 минуту, компрессию грудной клетки с частотой не менее 100 за 1 минуту.
^ 4. Проведите прекардиальный удар (если реаніматолог непосредственно наблюдает остановку кровообращения, а дефібрилятор в данный момент недоступне ). Эффективный при фибриляции желудочков (ФЖ) в первые 10 с. с момента наступления остановки кровообращения ). В такой ситуации прекардиальный удар осуществите немедленно локтевой поверхностью крепко сжатого кулака в нижню половину грудины с расстоянияі 20 см, придайте удару характер резкого импульса.
5. Начните штучную поддержку кровообращения . Начните компрессии грудной клетки (непрямой массаж сердца):
Станьте сбоку от потерпевшего.
Расположите основание ладони одной руки так, чтобы пальцы были паралельны ребрам на границе нижней и средней трети грудины.
Ладонь другой руки разместите перпендикулярно поверх первой.
Займите вертикальное положение над грудной клеткой потерпевшего.
Выпрямите руки в локтях и не сгибайте их во время компрессии.
Компрессии делайте с частотой не менее 100 за 1 мин. и глубиной
Контролируйте возвращение грудной клетки к исходному положению, не теряйте контакт с грудной клеткой.
После 30 компрессий произведите 2 выдоха в потерпевшего.
^ II стадия - стадия последующей поддержки жизни
(специализированный период)
Цель : возобновление самостоятельного кровообращения.
Включает медикаментозну поддержку, диагностику вида нарушения ритма сердца и дефибриляцию на фоне методов I стадии. Проводит специализированная бригада.
1. Медикаментозна поддержка . ESR (2005) рекомендует 2 пути введения лекарственных препаратов:
Внутривенный (в/в) - к центральным (подключичной или яремной) или периферическим венам. В этом случае препарат разведите в 10-20 мл физраствора;
Эндотрахеальный - с помощью катетера к эндотрахеальной трубке. В этом случае дозу препаратов увеличить в 2 раза и развести в 5 - 10 мл воды для инъекций.
Адреналин. Как только налажен внутривенный доступ, введите 1 миллиграмм адреналина. Независимо от других действий, адреналин продолжайте вводить в дозе 1 миллиграмм каждые 3-5 минут. СЛР продолжайте с проверкой сердечного ритма каждые 2 минуты и введением 1 миллиграмма адреналина каждые 3-5 минут реанимации до возобновления эффективного сердечного ритма или конвертации фибрилляции желудочков/желудочковой тахикардии (ФШ / ШТ) к шоконеудаляющему ритму.
Атропин . Является препаратом выбора при документируемой асистолии в дозе 3 миллиграмма, вводят одноразово, болюсно. При ассистолии и брадикардии, резистентной к введению атропина, введите эуфилина 2,4% 250-500 миллиграмм (5 миллиграмм / кг) в/в..
2. Дефибриляция. Убедитесь в том, что у пациента имеет место ФЖ/ЖТ, разместите электрод в классической грудинно-верхушечной позиции. Грудинный электрод установите справа от грудини под ключицей, верхушечный электрод - по средне-ключичной линии приблизительно на уровне ЭКГ електрода V6 (рис 3). После проведения первого начального разряда продолжайте СЛР с проверкой сердечного ритма каждые 2 минуты.
Рис. 3. Классическое размещение электродов дефибрилятора
Допустимы другие схеме размещения электродов :
Оба електрода на латеральной поверхности грудной клетки - один справа, второй слева (биаксилярне положение);
Один электрод в стандартном верхушечном положении, второй - на дорзальной поверхности грудной клетки справа или слева;
Один электрод впереди, на левой прекардиальной поверхности, второй - сзади, под левой лопаткой.
Сила давления на электроды должна составлять для взрослых приблизительно 8 кг . Для улучшения проводимости тока нанесите на контактную поверхность электродов проводник - специальный гель, воду, физраствор и т.п.
Методика проведения дефибриляции:
Врач, который проводити дефибриляцию, громко подает команду?розряд?, во время которой он и все члени бригады не касаются больного и кровати. После осуществления разряда без определения изменений ритма сердца продолжайте СЛР еще на протяжении 2 минут.
Быстро проверить характер сердечного ритма и при наличии персистирующей ФЖ/ЖТ проведите второй разряд дефибрилятора. Энергия первого и последующих разрядов для монополярних дефибриляторов составляет 360 Дж, для биполярных - 150-200Дж с последующим повышением к 360Дж.
Немедленно продолжить СЛР еще 2 минуты, после чего проверьте сердечной ритм. При сохранении ФЖ/ ЖТ введите адреналин и непосредственно после этого проведите третий разряд дефибрилятора. Продолжить СЛР еще 2 минуты.
Проверьте сердечный ритм. При сохранении ФЖ/ЖТ немедленно в/в введите 300 миллиграмм амиодарона и проведите четвертый разряд, продолжить СЛР . Следующую дозу амиодарона (150 миллиграмм) введите при рефрактерний ФЖ/ЖТ. За следующие 24 часа доза амиодарона может составить до 900-1200 миллиграмм. Лидокаин из расчета 1 мг/кг можете использоватьт как альтернативу амиодарону при отсутствии последнего, но лидокаин после амиодарона вводить нельзя.
Независимо от других действий, адреналин в дозе 1 миллиграмм вводить каждые 3-5 минут.
Реанимационные мероприятия проводить в таком режиме до возобновления эффективного сердечного ритма, или конвертации ФЖ/ЖТ в шоконеудаляемый ритм (см. также дополнение 2).
При подозрении на наличие гипомагниемии введите магнию сульфат (4 мл 50% раствора), при снижении рН крови меньше 7,1 или гиперкалиемии введите натрия гидрокарбонат (50мл 8,4% раствора).
^ III стадия - стадия длительной поддержки жизнедеятельности (писляреанимационный период)
Цель : возобновление функций мозга, послереанимационная интенсивная терапия.
В послеоперационном периоде осуществляют:
Поддержку нормотензии.
Поддержку парциального давления кислорода и углекислого газа (PaO2 и PaCo2).
Поддержку нормотермии. Пациентам без сознания после успешного СЛР рекомендуемая гипотермия тела (32-340С) на протяжении 12-24 ч.
Поддержку нормогликемии (4,4-6,1 ммоль/л). При уровне глюкозы более 9,1 моль / л следует назначать инсулин.
^ Дополнение 1. Противопоказання к проведению СЛР.
СЛР показана всем больным, которые находятся в состоянии клинической смерти и не имеют протипоказаний. СЛР не проводят при :
1) признаках биологической смерти;
2) смерти мозга;
3) терминальных стадиях неизлечимых болезней;
4) неоперабельних злокачественных образованиях с метастазированием;
5) если точно известно, что с момента остановки кровообращения прошло более 25 минут в условиях нормотермии.
^ Дополнение 2. Критерии прекращения реанимации [2,3]
СЛР может быть остановлена при:
Возобновлении самостоятельного кровообращения и появлении пульса на больших артериях и/или возобновлении самостоятельного дыхания;
Неэффективности реанимационных мероприятий на протяжении 30 минут;
Смерти сердца - развитии стойкой, по меньшей мере на протяжении 30 минут, электрической асистолии (прямой линии на ЭКГ), невзирая на СЛР и медикаментозную поддержку;
Признаках биологической смерти.
Дополнение 3. Диагностика смерти мозга.
Согласно Приказа № 226 от 25.09.2000 «Про утверждение нормативно-правовых документов по вопросам трансплантации» МОЗ Украины, смерть мозга определяют, как полное и необратимое прекращение всех его функций, которые регистрируют при работающем сердце и ИВЛ. Смерть мозга приравнивают к смерти человека.
Комплекс клинических критериев, наличие которых обязательная для установки диагноза смерти мозга (приказ МОЗ Украины №226):
Полное и стойкое отсутствие сознания (запятая).
Атония всех мышц.
Отсутствие реакции на сильные болевые раздражения.
Отсутствие реакции зрачков на прямой яркий свет.
Глазные яблоки неподвижны.
Отсутствие корнеальных рефлексов.
Отсутствие окулоцефалических рефлексов.
Отсутствие окуловестибулярных рефлексов.
Отсутствие фарингеальных и трахеальных рефлексов.
Отсутствие самостоятельного дыхания.
Тесты, которые подтверждают комплекс клинических критериев
При постановке диагноза смерти мозга следующие:
Определение отсутствия мозгового кровотока (по данным транскранеальной доплер-сонографии трижды с интервалом не менее, чем 30 минут).
Определение отсутствия усвоения кислорода мозговой
Тканью (отсутствие артериовенозной разницы парциального давления кислорода).
Необходимо отметить, что использование в качестве подтверждающих тестов электроэнцефалографии и панангиографии не предусмотрено Приказом № 226 от 25.09.2000г. «Про утверждение нормативно-правовых документов по вопросам трансплантации» Министерства Здравоохранения Украины.
Диагноз смерти мозга устанавливает консилиум врачей. После установления смерти мозга реанимационные мероприятия, включительно ИВЛ, могут быть прекращены.
Список литературы:
Глумчер Ф.С., Москаленко В.Ф. Неотложная медицинская помощь. Киев.: «м едицина», 2008. - с.52-53.
Дубров С.А., Глумчер Ф.С. Серцево-легенева реанімація// Внутрішня медицина, 2008. – с. 46-51.
Усенко Л.В, Царев А.В. Сердечно-легочная и церебральная реанимация. Практическое руководство, Днепропетровск, 2008. – с. 35-36.
Rosenberg M., Wang C. et al. Results of cardiopulmonary resuscitation: failure to predict survival in town community hospital // Arch. Intern. Med. – 1993. – Vol. 153(11). – р.1370 – 1375.
Abella B.S., Sandbo N. et al. Chest compression rates during cardiopulmonary resuscitation are suboptimal // Circulation. – 2005. – Vol. 111(2). – P 428 – 434.
Zoch T.W., Desbiens N.A. et al. Short- and long-term survival after cardiopulmonary resuscitation // Arch. Int. Med. – 2000. – Vol. 160(7). – P. 1969 – 1973.
Mayo V.J. The quest to improve cardiac arrest survival: overcoming the hemodynamic effect ov ventilation // Crit Care Med. – 2005. – Vol. 33. – P. 898 – 899.
Anthony J. Handley, Rudolph Koster, Koen Monsieurs, Gavin D. Perkins, Sian Davies, Leo Bossaert. European Resuscitation Council Guidelines for Resuscitation 2005 Section 2. Adult basic life support and use of automated external defibrillators. - P. 4 – 10.
Safar P. Reanimatology – the science of resuscitation // Critical Care Medicine/ - 1982. – V. 10, №2. – P.134-136.
Caldwell G., Millar G., Quinn E. Simple mechanical methods for cardioversion: defence of the precordial thump and cough version // Qr. Med. J. - 1985. – V. 291 – Р. 627-630.
Kohl P., King A.M., Boulin C. Antiarrhythmic effects of acute mechanical stiumulation. In: Kohl P., Sachs F., Franz M.R., editors. Cardiac mechano-electric feedback and arrhythmias: form pipette to patient. Philadelphia: Elsevier Saunders, 2005. - p. 304-314.
Charles D. Deakin, Jerry P. Nolan. European Resuscitation Council Guidelines for Resuscitation 2005 Section 3. Electrical therapies: Automated external defibrillators, defibrillation, cardioversion and pacing. - P. 27.
Deakin C., Sado D., Petley G., Clewlow F. Determining the optimal paddle force for external defibrillation/Am. J. Cardiol. – 2002. - V. 90. – P. 812-813.
Jerry P. Nolan, Charles D. Deakin, Jasmeet Soar, Bernd W. Bottiger, Gary Smith. European Resuscitation Council Guidelines for Resuscitation, 2005. Section 4. Adult advanced life support. - P.44 – 52.
Веками ученые пытались узнать о человеческом организме как можно больше и научиться исцелять больных от любой болезни. Одним из важных параметров является определение группы крови цоликлонами. Медицина выделяет у людей всего четыре группы крови не зависимо от половой или расовой принадлежности. Иммунологические признаки, которые и составляют основное различие по группе эритроцитарных антигенов, передаются по наследству.
Что такое цоликлон
Определение группы крови с помощью различных лабораторных реагентов стандартный метод исследований. Информация группе крови крайне важна, особенно в тех случаях, когда человеку нужна экстренная помощь. Перед хирургическим вмешательством обязательно определяется тип индивидуальных антигенных характеристик человека. Та же процедура является обязательно для военнослужащих (информация указывается на форме), для женщин перед родами и т.д.
Определение групп крови цоликлонами сравнительно новый метод исследования. Этот анализ может проводиться на любом этапе стационарного лечения пациентов.
Для осуществления лабораторного исследования не требуется много времени, достаточно наличие всех необходимых химических веществ (цоликлонов) и простого оборудования.
Цоликлоны по сути являются одним из видов иммуноглобулинов (тип М). Это моноклональные антитела, которые были образованы с помощью генной инженерии. Цоликлоны получены в результате воздействия сыворотки на стерильных лабораторных мышей. Образовывается скопление жидкости в брюшной полости грызуна, которая содержит эти антитела.
Подготовка к процедуре
Определение групп крови с помощью цоликлонов требует предварительной подготовки и действий согласно установленному алгоритму. Обстановка в помещении, в котором проводится анализ оговорена отдельно. Температура воздуха должна быть не ниже 15 и не выше 25 градусов, иначе результат исследования не может считаться достоверным. В помещении не должно быть пыли, животных, насекомых и других факторов, которые могут физически повлиять на процесс проведения исследования. Также проведение лабораторного анализа требует хорошей освещенности помещения.
При использовании цоликлонов важно держать флаконы плотно зарытыми и не допускать пересыхания реагентов, иначе способность антител к активным действиям заметно снижается. Перед процедурой подготавливается весь необходимый инвентарь. Для проведения анализа потребуется пробирка для биологического образца, планшет для нанесения реагентов, стерильные пипетки и палочки для взаимодействия с биологическими образцами.
Если лаборант проводит не только лабораторное исследование, но и забор крови, то необходимо подготовить одноразовые шприцы или вакуумные пробирки, жгут, медицинский спирт, ватные шарики и стерильные салфетки. Также под рукой должны быть инструменты для маркировки биообразов пациентов.
Проведения анализа
В современной лабораторной диагностике используется три вида стандартных цоликлонов для определения группы крови и резус фактора. Реагент типа «Анти-А» окрашен в красный цвет, также окрашен и флакон, колпачок или этикетка флакона». Тип «Анти-В» окрашивается синим, а «Анти АВ» не помечается цветным маркером. Производители реагентов выпускают упаковки с цоликлонами 5 или 10 мл. Не допускается использование испорченных или некачественных реагентов.
При наличии видимых дефектов упаковки или появлении хлопьев в жидкости, цоликлон не используют.
- Для определения группы крови на специально подготовленную пластину, которая оформлена как таблица, наносят цоликлоны различных типов (А, В и АВ). Каждый из них должен быть подписан. Реагент наносится на специально отмеченную область. Каждый тип цоликлона должен наноситься отдельной стерильной пипеткой.
- Рядом с реагентами помещается по 1 капле крови пациента.
- Стерильной палочкой реагенты смешивают с биологическим образцом.
- Уже спустя несколько секунд можно заметить изменения и происходящую реакцию агглютинации. По правилам наблюдение следует вести в течение 3 минут. После этого можно сделать вывод о результатах исследования.
Как понять результат
- Отсутствие какой-либо реакции склеивания во всех образцах означает, что в клетках эритроцитов пациента нет агглютиногена исследуемого типа. Образец крови причисляется к I группе (тип 0).
- Если эритроцитарные клетки пациента вступили в реакцию с реагентами типа «Анти-а» и «Анти-АВ», то у пациента II группа крови (тип А).
- Заметная агглютинация образца исследуемой крови с цоликлонами тип «Анти-АВ» и «Анти-В» означает, что пациент обладает III группой крови (тип В).
- Если кровь пациента вступила в реакцию со всеми химичсекими реагентами, то исследуемый образец принадлежит к IV группе (тип АВ). При определении группы крови с помощью цоликлонов дополнительной проверки не требуется, так как реагенты не содержат добавок, которые могут спровоцировать спонтанную реакцию.
Определение группы крови и резус фактора проводится в лабораторных учреждениях в медицинских учреждениях. Это достаточно простое исследование, которое дает очень полезную и жизненно важную информацию о человеке.
Основными методами переливания крови в практической медицине являются:
1. Прямое переливание крови непосредственно от донора к реципиенту
2. Непрямое переливание: донорская кровь консервируется и может храниться некоторое время до переливания
3. Обменное-заменное переливание. При нём из кровеносного русла удаляется гемолизированная, или содержащая яды кровь и вместо неё вводится донорская
4. Аутогемотрансфузия - переливание собственной, заранее заготовленной крови больному для обеспечения плановых операций
Составление наборов и определение групповой принадлежности и резус-фактора крови
Определение группы крови сo стандартными сывороткамиПроводится под руководством врача.
1. Приготовить: тарелки, пипетки, стеклянные палочки, флакон с кровью, шарики, спирт, сыворотки 2 серий.
2. Надеть стерильную одежду.
3. Нанести отдельными пипетками стандартные сыворотки по l-й капле в ячейки специальной тарелки по 2 серии (1, 2, 3 группы).
4. Нанести стеклянной палочкой мазок крови каждой капли сыворотки.
5. Смешать отдельными стеклянными палочками.
6. Добавить в каждую серию по 1 капле физиологического раствора.
7. Наблюдать за реакцией в течение 5 мин.
8. Поставить реакцию с IV группой, если во всех 6 ячейках тарелки произошла реакция агглютинация, для подтверждения результата
Определение группы крови с применением цоликлонов
1. Обработать ампулы с цоликлонами и ампулы с растворителем спиртом.2. Вскрыть ампулы с цоликлонами анти-А и анти-В и 2 ампулы растворителя
3. Перенести растворитель отдельными пипетками в ампулы с цоликлонами.
4. Встряхнуть несколько раз, закрыть ампулы (полученные реагенты можно хранить до 3 месяцев).
5. Нанести одну большую кашпо цоликлона анти-А и анти-В на чашку.
6. Нанести по одной маленькой капле крови рядом с каплей цоликлона (В 10 раз меньше).
7. Смешать кровь с раствором цоликлона отдельными стеклянными палочками.
8. Наблюдать в течение 2,5 мин и оценить реакцию по следующей схеме:
При наличии агглютинации она может остаться незамеченной:
- вследствие высокой температуры окружающей среды (28 0С и выше) - реакция начинается поздно или слабо выражена
- в случае неверного соотношения объемов сыворотки и крови; капля сыворотки должна быть в
- 8 раз больше капли крови
- при наличии в эритроцитах слабого агглютиногена
- при истечении срока годности сывороток или неправильном их хранении
Агглютинация ошибочно устанавливается при фактическом ее отсутствии:
- эритроциты склеиваются в «монетные столбики». Необходимо добавить в кровь физиологический раствор и смешать
- при низкой температуре окружающей среды (ниже 12°С) - появляются зерна из эритроцитов, напоминащие агютинащию
- при способности эритроцитов давать агглютинации со всеми стандартными сыворотками
- при долгом стоянии на воздухе смесь начинает подсыхать, появляется зернистость, похожая на агглютинацию
- при нечеткой маркировке на флаконах и ампулах, в сомнительных случаях необходимо провести повторную реакцию с гемаглютинирующей сывороткой другой серии
Определение резус-фактора по стандартной сыворотке-антирезус
- приготовить: пипетки, пробирки, физиологический раствор
- внести пипеткой 2 капли сыворотки в конусную пробирку
- добавить пипеткой 1 каплю крови
- встряхнуть пробирку
- добавить в пробирку 2 капли физиологического раствора
- встряхнуть пробирку или вращать между ладонями в течение 5 мин
- посмотреть на стенки пробирки и оценить результат. Если есть реакция, то у пациента резусположительный фактор
Выявление признаков непригодности крови к переливанию, транспортирование крови из отделения переливания крови
Выявление признаков непригодности крови к переливанию, транспортирование крови из отделения переливания крови.Показание: определение годности крови к переливанию.
Оснащение: флакон или контейнер с кровью.
Алгоритм действий:
1. Оценить герметичность упаковки: упаковка должна быть абсолютно целостной: никакие следы нарушения целостности недопустимы, при их наличии кровь непригодна для переливания.
2. Оценить правильность паспортизации:
- наличие этикетки с номером
- даты заготовки
- обозначения группы крови и резус принадлежности
- наименование консерванта
- фамилии и инициалов донора
- наименование учреждения-заготовителя
- подпись врача
- штампа о проверке на ВИЧ и вирусный гепатит
4. Оценить визуально кровь во флаконе: кровь должна быть разделена на три слоя - внизу - красные эритроциты, выше - узкая серая полоска лейкоцитов и тромбоцитов, над ней жёлтая прозрачная плазма). Плазма должна быть прозрачной: хлопья, пленки, сгустки в плазме свидетельствуют о ее инфицированности и непригодности к переливанию, а розовое окрашивание плазмы говорит о гемолизе эритроцитов и непригодности крови к переливанию.
Примечание. Плазма может быть непрозрачной в случае так называемой хиллёзной крови, т. е. крови, содержащей большое количество нейтральных жиров. При нагревании хиллёзной крови до 37 градусов Цельсия, плазма становится прозрачной, если же кровь инфицирована - остается мутной.
Проведение проб на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента. Постановка пробы на индивидуальность, совместимость
По группе крови:- взять у пациента кровь - до 5 мл в пробирку
- отцентрифугировать пробирку с кровью для получения сыворотки
- нанести пипеткой на тарелку 1 каплю сыворотки пациента и мазок крови донора
- смешать стеклянной палочкой сыворотку и кровь
- добавить 1 каплю физиологического раствора;
- наблюдать за реакцией в течение 5 минут
- если нет агглютинации, то гемотрансфузию проводить можно
- взять у больного кровь - до 5 мл в пробирку
- отцевтрифугировать пробирку с кровью больного для получения сыворотки
- нанести пипеткой на чашку Петри 1 каплю сыворотки больного и мазок крови донора
- смешать стеклянной палочкой сыворотку с кровью
- добавить 1 каплю физиологического раствора
- поставить чашку Петри на водяную баню (температура 500 градусов Цельсия)
- ждать результат в течение 10 минут
- если агглютинация отсутствует, можно проводить гемотрансфузию
- на дно пробирки внести 2 капли сыворотки больного, 1 каплю крови донора и 1 каплю 33%-ного полиглюкина
- встряхнуть пробирку
- пробирку наклонить почти горизонтально и медленно поворачивают вокруг оси в течение 5 мин
- долить в пробирку 3-4 мл изотонического раствора хлорида натрия
- перемешать, переворачивая пробирку (не взбалтывать!) 2-3 раза
- просмотреть на свет и оценить результат
реципиента.
Постановка биологической пробы
Биологическая проба проводится всем без исключения больным, даже находящимся поднаркозом, при переливании крови и кровезаменителей. Исключение составляет переливние тромбоцитарной массы.
1. Перелить струй но 10-15 мл крови или кровезаменителей внугривенно.
2. Закрыть систему на 3 мин.
3. Оценить состояние пациента.
4. Перелить струйно 10-15 мл крови или кровезаменителей внутривенно.
5. Закрыть систему на З мин.
6. Оценить состояние пациента.
7. Перелить струйно 10-15 мл крови или кровезаменителей внутривенно.
8. Оценить состояние пациента.
Примечание. При появлении болей в животе, в груди, пояснице, рвоты, головной боли, одышки, тахикардии, сыпи на коже кровь или кровезаменители вводить нельзя!
Оказание первой помощи при осложнении во время проведения биологической пробы
1. Срочно прекратить введение крови или кровезаменителей, пережав систему2. Снять флакон и систему, иглу оставить в вене
3. Сообщить врачу
4. Подключить иглу к другой системе, с солевым раствором
5. Наблюдать состояние пациента в течение 2 ч после стабилизации
Подготовка пациента к гемотрансфузии
1. Определить группу крови пациента и донора.2. Определить резус-принадлежность пациента и донора.
3. Взять кровь на общий анализ крови.
4. Взять мочу на общий анализ мочи.
5. Проверить годность крови во флаконе.
6. Не есть за 2 часа до гемотрансфузии.
7. Опорожнить мочевой пузырь перед перели.ванием крови.
8. Подсчитать пульс, измерить артериальное давление и температуру тела.
9. Поставить приборы на индивидуальную совместимость по группе крови и по резус-фактору.
10. Поставить биологическую пробу.
Определение группы крови и резус-фактора играет основополагающую роль в случаях, когда речь идет о спасении жизни человека. Именно по этой причине подобное исследование проводят всем пациентам в предоперационный период, беременным женщинам перед родами и во многих других ситуациях, которые могут потребовать срочного переливания. Существует несколько способов определения группы крови с использованием разных лабораторных реагентов, и один из них основывается на применении химических веществ под названием цоликлоны. Что же представляет собой определение группы крови цоликлонами и как проводится процедура?
Группа и резус-фактор – генетически обусловленные характеристики крови, которые наследуются от родителей и остаются неизменными на протяжении всей жизни человека . Классификация групп крови осуществляется, исходя из определенного набора биохимических параметров и состава антигенов, и насчитывает 4 основных группы. Переливание пациенту крови несовместимой группы или с другим резус-фактором несет с собой смертельную опасность – иммунная система начинает вырабатывать антитела против чужеродных клеток, которые атакуют и разрушают их. Именно по этой причине в ситуациях, которые несут с собой риск обширной кровопотери, необходимо точное определение принадлежности крови и резус-фактора как у донора, так и у реципиента.
Что такое цоликлоны?
Цоликлоны – это антитела, которые получают посредством технологий генной инженерии. Обычно для получения цоликлонов берутся лабораторные мыши – животным вводится специальный препарат, после чего производят забор жидкости из брюшной полости – именно она и содержит необходимые для проведения анализа вещества. С научной точки зрения, цилоклоны можно отнести к иммуноглобулинам М, которые способны реагировать с агглютиногенами – специфическими клетками, присутствующими на поверхности красных кровяных телец.
Именно агглютиногены, а точнее их типы, и служат основой для классификации групп крови: так, у носителей первой группы данные вещества отсутствуют, у обладателей второй имеются агглютиногены типа А и т. д. В ходе проведения процедуры определенные цоликлоны вступают в реакцию с разными типами агглютиногенов, что и позволяет определить группу крови пациента.
Цоликлоны выпускаются в виде жидкости, разлитой во флаконы по 5 мл или 10 мл, причем каждый ее тип имеет специфические характеристики:
- анти-А представляет собой жидкость красноватого цвета;
- анти-В имеет синий оттенок;
- анти-АВ (анти-D) – бесцветный прозрачный раствор.
Преимущество цоликлонов перед другими химическими реагентами заключается в том, что они не требуют специальной подготовки к анализу и позволяют провести его в кратчайшие сроки. Кроме того, они не являются клетками человеческого организма, поэтому инфекционное заражение медперсонала при контакте с веществами полностью исключено.
Как проводится исследование?
Для определения группы крови с использованием цоликлонов необходима плоская ровная поверхность (планшетка), смоченная водой, набор химических реагентов и пробы биологической жидкости, причем специалист может использовать любую кровь: капиллярную, венозную, замороженную и т. д.
- Стороны планшета помечают, чтобы не перепутать, на какую из них будет нанесен тот или иной тип цоликлонов.
- На поверхность капают по одной капле реагентов (обычно цилоклоны анти-А и анти-В) и крови, причем объем химических веществ должен в 8-10 раз превышать объем биоматериала.
- Подождать 3-5 минут, аккуратно покачивая планшет, чтобы жидкости хорошо смешались, а эритроциты не оседали по краям образцов.
Важно! Спустя несколько минут наступит реакция, по которой можно с высокой точностью определить принадлежность крови к определенной группе.
Интерпретация результатов процедуры проводится визуально – жидкости либо полностью соединяются, либо наступает склеивание (агглютинация) кровяных телец, вследствие чего биоматериал сворачивается и в нем образовываются мелкие хлопья.
Расшифровка осуществляется следующим образом:
- если реакция отсутствует во всех образцах биоматериала, его можно причислить к I группе (это означает, что агглютиноген в клетках крови отсутствует);
- вступление кровяных клеток в реакцию с цоликлоном анти-А свидетельствует о том, что кровь исследуемого человека относится к II группе;
- склеивание эритроцитов с цоликлоном анти-В – признак III группы крови;
- если биоматериал вступил в реакцию со всеми веществами, то он принадлежит к IV группе.
Для проверки точностии результатов и определения резус-фактора к образцам биоматериала добавляют цоликлон АВ – если произошла реакция агглютинации, он в крови определяется как положительный (отсутствие склеивания эритроцитов говорит об отрицательном резус-факторе). Чтобы исключить заболевания, при которых агглютинация происходит при контакте с любыми раздражителями, капля крови пациента смешивается с физраствором. В случаях, когда визуально определить результат невозможно, анализ переделывают, а образцы рассматривают под микроскопом.
Таблица. Реакции разных групп крови с цоликлоном анти-А и анти-В.
Что следует учитывать при проведении анализа?
Чтобы результат анализа был максимально достоверным, при проведении процедуры необходимо соблюдать ряд условий:
- реагенты должны храниться в холодном месте при температуре +2-8 градусов во флаконах с плотно закрученной крышкой (в случае нарушения правил хранения они быстро теряют свои свойства);
- для проведения анализа нельзя использовать цоликлоны с истекшим сроком хранения (он составляет около 30 дней) или жидкости, которые содержат осадок, хлопья или мусор;
- исследование выполняется в хорошо освещенном помещении при температуре воздуха не ниже +15 и не выше +25 градусов, причем в нем не должно быть грязи, пыли и других факторов, способных исказить результат;
Температура воздуха во время процедуры должна соответствовать
- при нанесении биоматериала и реагентов на поверхность планшетки следует точно соблюдать пропорции – если крови будет слишком много, реакцию сложнее отследить, а в противоположном случае (при малом объеме) она будет слишком медленной;
- нельзя допускать, чтобы капли крови, смешанные с разными типами цоликлонов, сливались вместе – если это случилось, исследование проводят заново; по этой же причине для смешивания реагентов с биоматериалом следует использовать разные палочки.
Продолжительность реакции должна составлять не менее 3 минут, а при сомнительном результате время наблюдения за образцами биоматериала следует продлить до 5 минут. Однако по истечении 10 минут может произойти подсыхание биоматериала и естественное выпадение эритроцитов в осадок, поэтому доверять такому исследованию не стоит.
Что может повлиять на результат?
Цоликлоны чувствительны к факторам окружающей среды, соответственно, при проведении исследования необходимо соблюдать температурный режим и правила гигиены – помещение должно быть чистым и сухим, а отдельные образцы крови не должны контактировать друг с другом. Кроме того, при некоторых патологиях кровь человека способна менять свои характеристики, вследствие чего проведение исследования существенно усложняется. Так, при дисфункции печени, селезенки, септических процессах и обширных ожогах у пациентов наблюдается так называемая панагглютинация крови – эритроциты выпадают в осадок даже при реакции с физраствором. У больных лейкозом и новорожденных младенцев наблюдается иная картина – кровяные тельца не реагируют на раздражители, из-за чего отследить реакцию склеивания становится невозможно.
Обратите внимание! Кроме того, у близнецов, людей с пересаженным костным мозгом или у тех, кто перенес неоднократное переливание крови, в биологических жидкостях уживаются разные типы эритроцитов – соответственно, при проведении анализа наблюдаются непредсказуемые результаты. Для определения группы в вышеперечисленных случаях требуются дополнительные лабораторные анализы с использованием специального оборудования.
Анализ с использованием цоликлонов – один из наиболее простых и точных способов определения группы крови человека. При соблюдении всех правил и условий проведения процедуры вероятность ошибочного результата сводится к минимуму, поэтому химические реагенты данного типа применяются практически во всех современных лабораториях.
Видео — Определения групп крови с помощью цоликлонов
1.пробирка с исследуемой кровью,
2.цоликлоны анти-А и анти В,
3.пипетки № 4 – для цоликлонов, изотонического раствора и крови,
4.изотонический раствор хлорида натрия,
5.песочные часы на 2-3 минуты, перчатки.
7.эмалированная маркированная тарелка с углублениями;
8.стерильный скоррификатор или шприц с иглой и резиновый жгут;
9.спирт 70 0 , ватные шарики.
Техника выполнения:
промаркировать планшет: написать на нём номер пробирки с кровью, цоликлоны анти-А и анти В,
надеть перчатки,
проверить качество цоликлонов (прозрачность, срок годности),
Отдельными пипетками нанести на планшет под соответствующими обозначениями по капле цоликлонов (Аи В),
Нанести на планшет под соответствующими обозначениями цоликлонов (Аи В), по капле исследуемой крови,
Смешать кровь пациента с цоликлонами разными стеклянными палочками (в разведении 1:10),
Перевернуть песочные часы, наблюдать 2,5-3 минуты, температура в помещении 15-25*С.
Для исключения неспецифической агглютинации добавить по 1-2 капли изотонического раствора хлорида натрия в каждую каплю.
Оценка результата .
Нет реакции агглютинации в цоликлонах А и В - 0 α β (первая группа крови).
Реакция агглютинации с цоликлоном анти-А - А β (вторая группа крови).
Реакция агглютинации с цоликлоном анти-В - B α (третья группа крови).
Реакция агглютинации с цоликлоном анти-А и анти-В – АВ0 (четвёртая группа крови).
Характеристика цоликлонов: цоликлоны анти-А и анти-В применяются для определения группы крови человека системы АВ0 взамен стандартных изогемагглютинирующих сывороток путём выявления антигенов А и В в эритроцитах стандартными антителами, содержащимися в цоликлонах.
Цоликлоны представляют разведённую асцитическую жидкость мышей – носителей гибридомы, содержащей иммуноглобулин М против антигенов А и В. При использовании цоликлонов исключается передача вируса гепатита и ВИЧ.
Выпускают цоликлоны в жидком виде, в ампулах или флаконах, жидкость окрашена в красный цвет – анти А и синиц цвет – анти В.
Хранят цоликлоны в холодильнике при температуре 2-8 градусов по Цельсию. Срок хранения 2 года.
Выполните задание.
| Определите соответствие: | |
| 1.Спленэктомия | А.Удаление части почки |
| 2.Холецистэктомия | Б.Удаление жклудка |
| 3.Резекция желудка | В.Наложение свища на трахею |
| 4.Цистостомия | Г.Удаление селезёнки |
| 5.Экстирпация матки | Д.Рассечение некроза |
| 6.Резекция желудка | Е.Удаление части кишечника |
| 7.Пиелолитотомия | Ж.Удаление камня из почечной лоханки |
| 8.Резекция почки | З.Наложение свища на толстую кишку |
| 9.Некрэктомия | И.Удаление желчного пузыря |
| 10.Гастрэктомия | К.Вскрытие брюшной полости |
| 11.Аденомэктомия (простатэктомия) | Л.Удаление части желудка |
| 12.Трахеостомия | М.Удаление почки |
| 13.Колостомия | Н.Удаление предстательной железы |
| 14.Илеостомия | О.Надлобковый свищ. Наложение свища на мочевой пузырь |
| 15.Лапаротомия | П.Наложение свища на подвздошную кишку |
| 16.Некротомия | Р.Удаление матки с придатками |
| 17.Нефрэктомия | С.Удаление некроза |
